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真芯擴(kuò)Hi-sincere PCR mix包含經(jīng)過(guò)改造后的高保真熱啟動(dòng)酶、dNTP、獨(dú)特的延伸因子、特異性促進(jìn)因子以及高性能的緩沖體系，具有優(yōu)越的擴(kuò)增能力、擴(kuò)增特異性，同時(shí)兼容部分粗品基因組DNA擴(kuò)增。真芯擴(kuò)Hi-sincere PCR mix中的聚合酶是一種經(jīng)過(guò)高通量篩選改造的超高保真DNA聚合酶，保真性約為普通Taq DNA 聚合酶的240倍。本產(chǎn)品中含有單克隆抗體，可進(jìn)行高特異性的熱啟動(dòng)PCR。2×Master Mix 用于PCR反應(yīng)時(shí)只需加入引物和模板即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，減少了復(fù)雜的加樣過(guò)程，提高檢測(cè)通量、結(jié)果的重復(fù)性和穩(wěn)定性。

本試劑盒適用于對(duì)保真度要求高的PCR擴(kuò)增、擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物的3'端不帶有“A”堿基，可直接克隆于平末端載體中。

??超高保真：保真性能是Taq DNA聚合酶的240倍。

??擴(kuò)增片段：可以兼容人血、鼠尾、水稻，高GC/AT等多種樣本類型。

??快速擴(kuò)增：延伸時(shí)間縮短至4-6kb/min。

? 穩(wěn)定性好：全預(yù)混體系室溫放置24h擴(kuò)增性能無(wú)影響；SuperPlus Pfx Master Mix37℃放置加速7天，擴(kuò)增性能無(wú)影響。

【實(shí)驗(yàn)一】

采用高通量測(cè)序技術(shù)，平行對(duì)比分析不同高保真聚合酶的擴(kuò)增保真度。

表1.CW3419保真度對(duì)比分析表

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：CW3419保真度是普通Taq DNA Polymerase的240倍。

【實(shí)驗(yàn)二】

使用CW3419分別對(duì)高GC（60%-80%）、高AT模型（60%-75%）、人血、水稻、粗裂解產(chǎn)物等多種復(fù)雜模板進(jìn)行不同片段長(zhǎng)度進(jìn)行擴(kuò)增。

圖1.CW3419不同樣本類型擴(kuò)增凝膠電泳圖

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：CW3419可以兼容人基因組、大腸桿菌、小鼠基因組、水稻基因組、高GC或高AT基因等不同樣本類型的DNA擴(kuò)增。

【實(shí)驗(yàn)三】

使用CW3419對(duì)比我司CW2965，分別測(cè)試延伸時(shí)間5s/10s/15s/30s

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：CW3419延伸速度更快。

【實(shí)驗(yàn)四】

將CW3419分別放置在不同溫區(qū)加速保存；全體系預(yù)混下分別常溫放置0h、1h、3h、6h、24h進(jìn)行對(duì)比擴(kuò)增。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：將CW3419在37℃加速7d性能依舊穩(wěn)定。全預(yù)混體系在常溫放置24h擴(kuò)增性能無(wú)影響。