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Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit

雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒

?758.00

CW9312M

100 T

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本產品是一款以螢光素 (luciferin) 為底物用于檢測哺乳動物細胞內螢火蟲螢光素酶 (firefly luciferase) 和海腎螢光素酶 (Renilla luciferase) 活性的試劑盒。螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61kD的蛋白酶,在ATP、鎂離子和氧氣的共同作用下催化luciferin氧化成oxyluciferin,從而產生波長為560nm的生物螢光 (bioluminescence) 。海腎螢光素酶是一種分子量為36kDa的蛋白酶,在氧氣存在的條件下,可以催化腔腸素 (Coelenterazine) 氧化成Coelenteramide,在Coelenterazine氧化的過程中也會產生波長為465nm的生物螢光。這種螢光可以通過化學發光儀、酶標儀或液閃測定儀進行測定。本試劑盒的檢測原理參考下圖。

在雙螢光素酶報告基因檢測中,螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。先以螢光素為底物來檢測螢火蟲螢光素酶的活性,然后加入抑制螢火蟲螢光素酶催化的物質,同時加入腔腸素檢測海腎螢光素酶的活性,實現雙螢光素酶報告基因檢測。通過螢光素酶和其底物這一生物發光體系,可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。


通常把目的基因的轉錄調控元件或5'啟動子區克隆在Luciferase 的上游,或把3'-UTR 區克隆在Luciferase 的下游,構建成報告基因(Reporter gene)質粒。然后轉染細胞,用適當藥物等處理細胞后裂解細胞,通過檢測螢光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。海腎螢光素酶更多地被用作檢測轉染效率的內參,以排除不同組之間細胞生長狀況、細胞數目以及轉染效率帶來的干擾。


本產品具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣、無細胞內源活性干擾等優勢。

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-20±5℃,away from light 冰袋

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