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隨心擴 Omnipotent PCR mix

全能PCR擴增預(yù)混液

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隨心擴 Omnipotent PCR mix 包含 Super DNA Polymerase、dNTP、獨特的延伸因子以及高性能的優(yōu)化緩沖體系,只需加入引物和模板即可進(jìn)行PCR實驗,減少了復(fù)雜的加樣過程。隨心擴Omnipotent PCR mix兼具5'→3'DNA聚合酶活性和3'一5'外切酶活性,其保真性約為Taq DNA聚合酶的80倍,擴增產(chǎn)物為平末端。該酶是經(jīng)過多重封閉的高保真酶,特異性好,延伸能力強適用于100 bp-40 kb目的片段擴增,尤其適合擴增≥10 kb的片段,擴增速度高達(dá)10 s/kb,大幅節(jié)省PCR反應(yīng)時間。同時該Mix兼具抗抑制能力強的特點,可適用于各種粗提模板的擴增。

本產(chǎn)品具有延伸速度快、特異性好、抗抑制能力強等特點,可適用于不同類型不同物種模板的名種大小片段的普通擴增及粗提擴增;下游可應(yīng)用于基因分型、高通量測序、長片段擴增等多個領(lǐng)域。


? 長片段擴增能力強:人基因組DNA模 板可擴增34 kb目的片段。

? 延伸速度快:延伸時間可快至 1 sec/kb (2 kb以內(nèi)目的片段)。

? 可擴增高GC模版:人基因組DNA 模板可擴增40% ~80%GC含量。

? 抗抑制性強:有效擴增血液、 鼠尾粗提產(chǎn)物等樣本。

保存條件 運輸條件
-20±5℃ 冰袋
Q1:模板是cDNA,可以用來擴長片段嗎?
A1:

可以,但要保證cDNA確實有這樣的長度,即RNA質(zhì)量必須要好,逆轉(zhuǎn)錄時只用引物Oligo dT。

Q2:出現(xiàn)假陽性擴增。
A2:

引物設(shè)計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進(jìn)行PCR擴增時,擴增出的PCR產(chǎn)物為非目的性的序列,靶序列太短或引物太短,容易出現(xiàn)假陽性,需重新設(shè)計引物;靶序列或擴增產(chǎn)物的交叉污染。

Q3:擴增效率低出現(xiàn)條帶較弱或無擴增的情況。
A3:

優(yōu)化反應(yīng)體系與條件:升高退火溫度可以有效提高特異性。另外減少循環(huán)數(shù),也可以提高特異性,但都會導(dǎo)致擴增效率的下降,需要根據(jù)具體的實驗要求優(yōu)化合適的條件。還可以嘗試某些特殊的程序,如巢式PCR、Touch Down PCR等;PCR產(chǎn)物需要進(jìn)行后續(xù)實驗時,如果確定有目的條帶擴增,可以凝膠回收目的條帶。

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